特级西西人体444WWW高清大胆,亚洲AV无码国产永久播放蜜芽,亚洲日韩国产一区二区三区,免费一级毛片久久久



    

        

            
            
買正宗三七，就上三七通

            

                
                
            

        

        
        
    






    

        

            當前位置：首頁/基地圖片>
                                    三七皂苷超高效液相色譜測定，Waters超高效液相色譜儀多少錢 
        

    






    

        

            
三七皂苷超高效液相色譜測定，Waters超高效液相色譜儀多少錢 


            

                發(fā)布時間：2023-06-11 10:45
                編輯：網(wǎng)絡 
                   點擊：427
            


            

                

                    本文目錄一覽Waters超高效液相色譜儀多少錢2，三七總皂苷液相色譜出峰順序3，高效毛細管電泳技術(shù)和高效液相色譜技術(shù)的區(qū)別4，三七皂苷的研究論文5，超高效液相色譜質(zhì)譜儀能分析什么6，公司把普通液相換成了安捷倫的超高效液相測發(fā)酵液中的蛋白……
                

            


            




                
本文目錄一覽
1，Waters超高效液相色譜儀多少錢


免稅30多萬起。看你怎么配置了
uplc60萬左右
水貨的UPLC大概在3W美金到4W美金之間吧~~十幾萬人民幣的應該是水貨的HPLC~
三七皂苷超高效液相色譜測定


2，三七總皂苷液相色譜出峰順序









反相液相色譜法中,物質(zhì)極性強的先出峰,極性弱的后出峰,在正相色譜中相反,物質(zhì)極性強的后出峰,極性弱的先出峰。  當然這個不是完全固定的。具體的看你的實驗方法,看固定相和流動相。 一般反相色譜是極性大的先出峰,極性小的后出峰。不過如果流動相中有酸堿性就不一定了。比如流動相是弱酸性的,那么樣品中的堿性物質(zhì)會提前出峰。


三七皂苷超高效液相色譜測定


3，高效毛細管電泳技術(shù)和高效液相色譜技術(shù)的區(qū)別


高效毛細管電泳法高（HPCE）又稱毛細管電泳（CE），高效液相色譜法（High Performance Liquid Chromatography ， HPLC）又稱“高壓液相色譜”高效毛細管電泳法。CE和HPLC相比, 其相同處在于都是高效分離技術(shù), 操作均可自動化, 且有多種不同分離模式。差異在于：（1）CE用遷移時間取代HPLC中的保留時間, CE的分析時間通常不超過30min, 比HPLC速度快；其他分離存在兩相，電泳是均相。（2）對CE而言,理論塔板高度和溶質(zhì)的擴散系數(shù)成正比, 對擴散系數(shù)小的生物大分子而言, 其柱效高。（3）CE所需樣品為nl級, 最低可達270 fl, 流動相用量也只需幾毫升, 而HPLC所需樣品為μl級, 流動相則需幾百毫升乃至更多；但CE僅能實現(xiàn)微量制備, 而HPLC可作常量制備。
不可以。現(xiàn)在新出超高效液相色譜，使用超小耐高壓色譜柱，與氣相色譜的毛細柱有異曲同工之處。
三七皂苷超高效液相色譜測定


4，三七皂苷的研究論文









學術(shù)論文在形式上是屬于議論文的，但它與一般議論文不同，它必須是有自己的理論系統(tǒng)的，不能只是材料的羅列，應對大量的事實、材料進行分析、研究，使感性認識上升到理性認識。一般來說，學術(shù)論文具有論證色彩，或具有論辯色彩。論文的內(nèi)容必須符合歷史唯物主義和唯物辯證法，符合“實事求是”、“有的放矢”、“既分析又綜合” 的科學研究方法。




5，超高效液相色譜質(zhì)譜儀能分析什么


我們學校的也是，但是版本比較舊。LC-MS一般疾控都是拿來做農(nóng)殘檢測。但是塑化劑，三聚氰胺等有機物也是很容易檢測的。微量元素，金屬之類的東西，一般用光學檢測，原子吸收和ICP比較適用。一般液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用都是檢測有機物用的。
這類設備分六大類，價格高昂，使用者不多。從你講的來看應該是離子陘，定性的；或者是三級四極桿，定量用的。這兩類液質(zhì)聯(lián)用儀都是 作小分子有機化合物分析的。不是做微量元素和重金屬的。
原理是一致的。不同的地方一個是儀器，一個是色譜柱。后者超高效液相色譜，可以縮短檢測時間，節(jié)省時間，節(jié)省流動相，大大地提高了效率。先說色譜柱，超高效液相色譜柱的粒徑會更小，柱子也更短。如果說樣品流過液相色譜柱的感覺是流過滿是石頭的管路，那么超高效液相色譜柱就是裝滿了沙子的管路。一般液相色譜柱的粒徑是5um，超高效液相色譜柱的粒徑有3.5um，3.0um，甚至有1.7um。這樣樣品和固定相的吸附會更加充分，分離也會很快。再說儀器，剛才說到的滿是沙子的管路，因為色譜柱的粒徑減小，所以柱壓會大大提高。這樣普通的液相色譜儀也就不耐受這種高壓了。所以超高效液相色譜儀，從泵，到各個管路都是耐高壓的。這樣可以充分發(fā)揮色譜柱的作用，快速分離樣品。上面一張圖是高效液相色譜圖，15min分析出的一個樣品。下面一張圖是超高效液相色譜圖，同一個樣品，7min就分析完畢。而且峰型更好。
液相色譜多用于檢測帶紫外吸收或熒光效應的“化合物”。元素和金屬液相是肯定不可以的，ICP還有ICP-MS之類的儀器才可以。


6，公司把普通液相換成了安捷倫的超高效液相測發(fā)酵液中的蛋白表達


分析糖用shodex的糖柱，分析蛋白建議用tsk-gel的凝膠色譜柱
高效液相色譜儀可分為“高壓輸液泵”、“色譜柱”、“進樣器”、“檢測器”、“餾分收集器”以及“數(shù)據(jù)獲取與處理系統(tǒng)”等部分。高壓輸液泵　　功能　　驅(qū)動流動相和樣品通過色譜分離柱和檢測系統(tǒng)；　　性能要求　　流量穩(wěn)定（±1），耐高壓（30～60Mpa），耐各種流動相：例如：有機溶劑、水和緩沖液；　　種類　　往復泵和隔膜泵。色譜柱　　功能　　分離樣品中的各個物質(zhì)；　　尺寸　　10～30cm長，2～5mm內(nèi)徑的內(nèi)壁拋光的不銹鋼管柱；　　填料粒度　　5 ～ 10μm ，高效微粒固定相；進樣器　　功能　　將待分析樣品引入色譜系統(tǒng)；　　種類　　①注射器，10Mpa以下，1～10μm微量注射器進樣　　②停流進樣　　③閥進樣，常用、較 理想、體積可變，可固定　　④自動進樣器，有利于重復操作，實現(xiàn)自動化檢測器　　功能　　將被分析組在柱流出液中濃度的變化轉(zhuǎn)化為光學或電學信號；　　分類　　①示差折光化學檢測器　　②紫外吸收檢測器　　③紫外一可同分光光度檢測器　　④二極管陣列紫外檢測器　　⑤熒光檢測器　　⑥電化學檢測器餾分收集器　　功能　　如果所進行的色譜分離不是為了純粹的色譜分析，而是為了做其它波譜鑒定，或獲取少量試驗樣品的小型制備，餾分收集是必要的；　　方法　　①手工，少數(shù)幾個餾分，手續(xù)麻煩，易出差錯。　　②餾分收集器收集，比較理想，微機控制操作準確。數(shù)據(jù)獲取和處理系統(tǒng)　　功能　　把檢測器檢測到的信號顯示出來。朋友可以到行業(yè)內(nèi)專業(yè)的網(wǎng)站進行交流學習！分析測試百科網(wǎng)這塊做得不錯，氣相、液相、質(zhì)譜、光譜、藥物分析、化學分析、食品分析。這方面的專家比較多，基本上問題都能得到解答，有問題可去那提問，網(wǎng)址百度搜下就有。


7，超高效液相色譜的應用


檢測基因變異，dna 微衛(wèi)星鑒定、腫瘤雜 合性缺失的檢測、rt2pcr 的競爭性定量、人種遺傳學分析、 基因作圖、核酶中自身剪切反應的研究、cpg島甲基化的分 析、細菌鑒定、dna 片段大小測定及寡核苷酸的分析 和純化等許多基因組研究領(lǐng)域中;此外,dhplc 最近已被進 一步應用到mrna 的檢測中,例如, gallo 等建立方法對 mrna的可變剪接或轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的編輯進行了檢測;matin 等[18 ]將dhplc 與差異顯示mrna 法(defferential mrna dis2 play method) 的原理相結(jié)合,可用于鑒定差異表達的基因。 詳見 <a  target="_blank">http://gene.bjmu.edu.cn/news/download/84/7.pdf</a>
如今，超高效液相色譜儀主要應用于（1）藥物分析 如天然產(chǎn)物中復雜組分的分析（2）生化分析 如蛋白質(zhì)、多肽、代謝組學等生化樣品（3）食品分析 如食品中農(nóng)藥殘留的檢測（4）環(huán)境分析 如水中微囊藻毒素的檢測（5）其他   如化妝品中違禁品的檢測超高效液相色譜儀尤其對中藥研究領(lǐng)域的發(fā)展是一個極大的促進。中藥的組分復雜，分離困難等問題都可以通過超高效液相色譜法逐漸解決。在同樣條件下，UPLC能分離的色譜峰比HPLC多出一倍還多。在同樣條件下，UPLC的分辨率能夠認出更多的色譜峰。相信在分析實驗室中超高效液相色譜會越來越普及，讓液相色譜法得到飛躍和進步。


8，高效液相色譜法HPLC測茶葉中有效成分的含量


高效液相色譜法是以液體作為流動相，借助于高壓輸液泵獲得相對較高流速的液流以提高分離速度、并采用顆粒極細的高效固定相制成的色譜柱進行分離和分析的一種色譜方法。在高效液相色譜中，若采用非極性固定相，如十八烷基鍵合相，極性流動相，即構(gòu)成反相色譜分離系統(tǒng)。反之，則稱為正相色譜分離系統(tǒng)。反相色譜系統(tǒng)所使用的流動相成本較低，應用也更為廣泛。中國是茶的故鄉(xiāng)，制茶、飲茶已有幾千年歷史，名品薈萃，主要品種有綠茶、紅茶、烏龍茶、花茶、白茶、黃茶。茶有健身、治疾之藥物療效，又富欣賞情趣，可陶冶情操。茶葉的營養(yǎng)價值和藥理作用是與它的化學成分分不開的。它的化學組成約有四百多種，其中對人體營養(yǎng)價值與藥理作用關(guān)系比較密切的是多酚類、生物堿和維生素。茶多酚類物質(zhì)是茶葉主要的呈味物質(zhì)，苦味。茶葉中含量比較高，總量占干茶物質(zhì)的18％～36％，是茶葉藥用價值的最主要的物質(zhì)基礎(chǔ)，具有降血脂、抗腫瘤、抗脂質(zhì)過氧化、抗菌和抗病毒、調(diào)節(jié)免疫功能等功效。茶多酚實際上是多種多酚類化合物的總稱，其中最重要的是兒茶素類化合物，它占茶多酚總量的50％～70％。茶葉指紋圖譜是利用茶內(nèi)含物質(zhì)的秘密、茶樹遺傳的密碼、用圖譜的方式來表述具有不同特性的茶葉,可包含種類、產(chǎn)區(qū)、樹齡、特性、制成品的年份等。本實驗用HPLC對茶葉的主要成分進行分離，是建立茶葉指紋圖譜的基礎(chǔ)。實驗過程中有可能會帶入一些雜質(zhì)，因此實驗結(jié)束后必須清洗柱子。三、儀器與試劑  1.	儀器：Agilent1100 高效液相色譜儀， 50ul微量注射器。2.	試劑：（1）甲醇  色譜純。（2）乙腈  色譜純。（3）甲酸  分析純。四、實驗步驟1、色譜條件色譜柱：色譜柱：XB-Phenyl ,5μm,4.6x150mm柱溫：室溫流動相：乙腈    1%甲酸 /%檢測器：DAD。檢測波長：276nm進樣體積：20??l定量環(huán)，實際注射每次可控制在50??l。梯度洗脫：2、待測溶液的配制取兩種不同的綠茶，分別標記為綠茶1、綠茶2。各取約0.8000g，用50ml沸水沖泡，分別在10min、30min取上清液，過0.45μm濾頭，即得樣品1（綠茶1沖泡10min）、樣品2（綠茶1沖泡30min）、樣品3（綠茶2沖泡10min）、樣品4（綠茶2沖泡30min）。4、色譜測定(1) 按操作規(guī)程開啟電腦，開啟脫氣機、泵、檢測器等的電源，啟動Agilent 1100在線工作軟件，設定操作條件。流量為1.00ml/min。(2) 待儀器穩(wěn)定后，開始進樣。將進樣閥柄置于“LOAD”位置，用微量注射器吸取混合物溶液50ul，注入儀器進樣口，順時針方向扳動進樣閥至“INJECT”位置，此時顯示屏顯示進樣標志。(3) 記下各組分色譜峰的保留時間及峰面積。并將測試報告打印成htm式，以便直接貼到實驗報告中。(4) 實驗完畢，清洗系統(tǒng)及色譜柱。
高效液相色譜儀操作步驟：　1)． 過濾流動相，根據(jù)需要選擇不同的濾膜。2)． 對抽濾后的流動相進行超聲脫氣10-20分鐘。3)． 打開HPLC工作站（包括計算機軟件和色譜儀），連接好流動相管道，連接檢測系統(tǒng)。4)． 進入HPLC控制界面主菜單，點擊manual，進入手動菜單。5)． 有一段時間沒用，或者換了新的流動相，需要先沖洗泵和進樣閥。沖洗泵，直接在泵的出水口，用針頭抽取。沖洗進樣閥，需要在manual菜單下，先點擊purge，再點擊start，沖洗時速度不要超過10 ml/min。6)． 調(diào)節(jié)流量，初次使用新的流動相，可以先試一下壓力，流速越大，壓力越大，一般不要超過2000。點擊injure，選用合適的流速，點擊on，走基線，觀察基線的情況。7)． 設計走樣方法。點擊file，選取select users and methods，可以選取現(xiàn)有的各種走樣方法。若需建立一個新的方法，點擊new method。選取需要的配件，包括進樣閥，泵，檢測器等，根據(jù)需要而不同。選完后，點擊protocol。一個完整的走樣方法需要包括：a.進樣前的穩(wěn)流，一般2-5分鐘；b.基線歸零；c.進樣閥的loading-inject轉(zhuǎn)換；d.走樣時間，隨不同的樣品而不同。8)． 進樣和進樣后操作。選定走樣方法，點擊start。進樣，所有的樣品均需過濾。方法走完后，點擊postrun，可記錄數(shù)據(jù)和做標記等。全部樣品走完后，再用上面的方法走一段基線，洗掉剩余物。9)． 關(guān)機時，先關(guān)計算機，再關(guān)液相色譜。10)． 填寫登記本，由負責人簽字。


9，高效液相色譜方法及應用的目錄


第一章 緒論第一節(jié) 高效液相色譜法的特點一、與經(jīng)典液相(柱)色譜法比較二、與氣相色譜法比較三、高效液相色譜法的優(yōu)點四、高效液相色譜方法發(fā)展簡介第二節(jié) 高效液相色譜法的分類一、按溶質(zhì)在兩相分離過程的物理化學原理分類二、按溶質(zhì)在色譜柱洗脫的動力學過程分類第三節(jié) 高效液相色譜法的應用范圍和局限性一、應用范圍二、方法的局限性參考文獻第二章 高效液相色譜儀簡介第一節(jié) 流動相及儲液罐一、儲液罐二、流動相脫氣第二節(jié) 高壓輸液泵及梯度洗脫裝置一、高壓輸液泵二、輸液系統(tǒng)的輔助設備三、梯度洗脫裝置第三節(jié) 進樣裝置一、停流進樣裝置二、六通閥進樣裝置三、自動進樣器第四節(jié) 色譜柱一、柱材料及規(guī)格二、柱填料三、保護柱四、柱連接方式五、柱溫控制第五節(jié) 檢測器一、檢測器的分類和響應特性二、紫外吸收檢測器三、折光指數(shù)檢測器四、電導檢測器五、熒光檢測器六、蒸發(fā)光散射檢測器第六節(jié) 色譜數(shù)據(jù)處理裝置一、微處理機二、色譜工作站參考文獻第三章 液固色譜法和液液色譜法第一節(jié) 分離原理一、吸附系數(shù)二、分配系數(shù)第二節(jié) 固定相一、液固色譜固定相二、液液色譜固定相第三節(jié) 流動相一、表征溶劑特性的重要參數(shù)二、液固和液液色譜的流動相第四節(jié) 二元溶劑體系中液固和液液色譜的保留規(guī)律一、溶質(zhì)保留值的基本方程式二、液固色譜的保留值方程式三、液液色譜的保留值方程式參考文獻第四章 鍵合相色譜法第一節(jié) 分離原理一、正相鍵合相色譜法的分離原理二、反相鍵合相色譜法的分離原理第二節(jié) 固定相一、鍵合固定相的制備及分類二、鍵合固定相的性質(zhì)三、使用鍵合固定相應注意的問題第三節(jié) 流動相一、溶劑的選擇性分組二、在鍵合相色譜中選擇流動相的一般原則三、改善色譜分離選擇性的方法四、多元混合溶劑的多重選擇性五、溶質(zhì)保留值隨溶劑極性變化的一般保留規(guī)律六、用線性溶劑化自由能關(guān)系（LSER）來表征反相液相色譜中溶質(zhì)的保留值方程式第四節(jié) 新型高效液相色譜的固定相和流動相一、新型高效化學鍵合固定相二、化學鍵合固定相分類方法簡介三、整體色譜柱四、超熱水流動相第五節(jié) 離子對色譜法一、分離原理二、固定相、流動相和對（反）離子三、影響離子對色譜分離選擇性的因素參考文獻第五章 梯度洗脫第一節(jié) 基本原理一、等度洗脫二、梯度洗脫第二節(jié) 影響梯度洗脫的各種因素一、梯度洗脫時間(?t???G)對分離的影響二、強洗脫溶劑組分B濃度變化范圍的影響三、梯度陡度對保留值的影響四、柱溫變化對保留值的影響五、梯度洗脫程序曲線形狀的影響六、影響梯度洗脫的其他變量第三節(jié) 優(yōu)化梯度洗脫的方法一、建立梯度洗脫方法的一般步驟二、梯度洗脫中的實驗條件第四節(jié) 梯度洗脫的圖示方法一、二元溶劑梯度洗脫二、三元溶劑梯度洗脫三、四元溶劑梯度洗脫四、用極坐標和球面坐標描述梯度洗脫參考文獻第六章 體積排阻色譜法第一節(jié) 分離原理一、分布系數(shù)二、體積排阻色譜法的特點第二節(jié) 固定相一、固定相的分類二、凝膠固定相的特性參數(shù)三、凝膠色譜柱的制備及譜圖特點第三節(jié) 流動相一、凝膠滲透色譜的流動相二、凝膠過濾色譜的流動相第四節(jié) 凝膠滲透色譜法測定聚合物分子量分布一、聚合物分子量、分子量分布及測定的意義二、凝膠滲透色譜圖的解析及數(shù)據(jù)處理參考文獻第七章 高效液相色譜法的基本理論第一節(jié) 表征液相色譜柱填充性能的重要參數(shù)一、總孔率二、柱壓力降三、柱滲透率第二節(jié) 高效液相色譜的速率理論一、影響色譜峰形擴展的各種因素二、范第姆特方程式的表達及圖示第三節(jié) 諾克斯方程式一、描述色譜柱性能的折合參數(shù)二、諾克斯方程式第四節(jié) 色譜柱操作參數(shù)的優(yōu)化一、三個柱操作參數(shù)的表達式二、HPLC中實用柱操作參數(shù)的優(yōu)化三、柱操作參數(shù)優(yōu)化的圖示表達方法第五節(jié) “無限直徑”效應和柱外效應一、“無限直徑”效應二、柱外效應第六節(jié) 超高效液相色譜一、超高效液相色譜的理論基礎(chǔ)二、實現(xiàn)超高效液相色譜的必要條件三、超高效液相色譜的應用參考文獻第八章 高效液相色譜分離條件的優(yōu)化第一節(jié) 高效液相色譜中色譜參數(shù)的相關(guān)性一、色譜參數(shù)的分類二、色譜參數(shù)的相關(guān)性第二節(jié) 色譜分離條件優(yōu)化標準的選擇一、難分離物質(zhì)對的峰對分離優(yōu)化標準二、整體色譜圖的優(yōu)化標準第三節(jié) 色譜響應函數(shù)和色譜優(yōu)化函數(shù)一、Morgan和Deming提出的色譜響應函數(shù)二、Watson和Carr提出的色譜響應函數(shù)三、Glajch和Kirkland提出的色譜優(yōu)化函數(shù)四、Berridge提出的色譜響應函數(shù)第四節(jié) 色譜分離條件的優(yōu)化方法一、單純形法二、窗圖法三、混合液設計實驗法四、重疊分離度圖法五、等強度洗脫和梯度洗脫的優(yōu)化圖示法第五節(jié) 優(yōu)化HPLC分離的計算機輔助方法一、實驗設計系統(tǒng)二、人工智能系統(tǒng)第六節(jié) 高效液相色譜專家系統(tǒng)簡介一、專家系統(tǒng)的組成二、專家系統(tǒng)的使用方法參考文獻第九章 微柱液相色譜法第一節(jié) 方法簡介一、微型柱的分類二、微柱液相色譜法的優(yōu)點和缺點第二節(jié) 基本理論一、柱外效應二、管壁效應三、稀釋效應四、分離阻抗第三節(jié) 儀器裝置一、輸液泵系統(tǒng)二、進樣系統(tǒng)三、柱系統(tǒng)四、檢測器系統(tǒng)五、連接管和接頭第四節(jié) 微柱的制備一、評價微柱性能的重要參數(shù)二、影響微柱分離效率的相關(guān)參數(shù)三、微柱的制備方法第五節(jié) 微柱液相色譜的新技術(shù)一、納米液相色譜技術(shù)二、超高壓液相色譜技術(shù)參考文獻第十章 二維高效液相色譜法第一節(jié) 描述分離體系效能的參數(shù)一、峰容量二、信息量第二節(jié) 二維高效液相色譜的技術(shù)功能一、切割功能二、反沖洗脫功能三、痕量組分的富集功能第三節(jié) 二維高效液相色譜的流路系統(tǒng)一、多通路切換閥二、二維高效液相色譜的流路系統(tǒng)第四節(jié) 二維高效液相色譜在蛋白質(zhì)組學研究中的應用參考文獻第十一章 建立高效液相色譜分析方法的一般步驟和實驗技術(shù)第一節(jié) 樣品的性質(zhì)及柱分離模式的選擇一、樣品的溶解度二、樣品的分子量范圍三、樣品的分子結(jié)構(gòu)和分析特性第二節(jié) 分離操作條件的選擇一、容量因子和死時間的測量二、色譜柱操作參數(shù)的選擇三、樣品組分保留值和容量因子的選擇四、相鄰組分的選擇性系數(shù)和分離度的選擇第三節(jié) 高效液相色譜法的實驗技術(shù)一、溶劑的純化技術(shù)二、色譜柱的裝填技術(shù)三、色譜柱的平衡、保護與清洗、再生技術(shù)四、梯度洗脫技術(shù)五、色譜柱前和柱后的衍生化技術(shù)六、樣品的預處理技術(shù)參考文獻符號表
原理主要有這幾種：液—液分配色譜法  (liquid-liquid partition chromatography)及化學鍵合相色譜(chemically bonded phase chromatography)   流動相和固定相都是液體。流動相與固定相之間應互不相溶（極性不同，避免固定液流失），有一個明顯的分界面。當試樣進入色譜柱，溶質(zhì)在兩相間進行分配。達到平衡時，服從于高效液相色譜計算公式：   高效液相色譜計算公式式中，cs—溶質(zhì)在固定相中濃度；cm--溶質(zhì)在流動相中的濃度； vs—固定相的體積；vm—流動相的體積。llpc與gpc有相似之處，即分離的順序取決于k，k大的組分保留值大；但也有不同之處，gpc中，流動相對k影響不大，llpc流動相對k影響較大。   a. 正相液 — 液分配色譜法(normal phase liquid chromatography): 流動相的極性小于固定液的極性。   b. 反相液 — 液分配色譜法(reverse phase liquid chromatography): 流動相的極性大于固定液的極性。   c. 液 — 液分配色譜法的缺點：盡管流動相與固定相的極性要求完全不同，但固定液在流動相中仍有微量溶解；流動相通過色譜柱時的機械沖擊力，會造成固定液流失。上世紀70年代末發(fā)展的化學鍵合固定相（見后），可克服上述缺點。現(xiàn)在應用很廣泛（70~80%）。液—固色譜法  流動相為液體，固定相為吸附劑（如硅膠、氧化鋁等）。這是根據(jù)物質(zhì)吸附作用的不同來進行分離的。其作用機制是：當試樣進入色譜柱時，溶質(zhì)分子 (x) 和溶劑分子(s)對吸附劑表面活性中心發(fā)生競爭吸附（未進樣時，所有的吸附劑活性中心吸附的是s），可表示如下：xm nsa ====== xa nsm   式中：xm--流動相中的溶質(zhì)分子；sa--固定相中的溶劑分子；xa--固定相中的溶質(zhì)分子；sm--流動相中的溶劑分子。   當吸附競爭反應達平衡時：   k=[xa][sm]/[xm][sa]   式中：k為吸附平衡常數(shù)。[討論：k越大，保留值越大。]離子交換色譜法  (ion-exchange chromatography)   iec是以離子交換劑作為固定相。iec是基于離子交換樹脂上可電離的離子與流   離子交換色譜柱動相中具有相同電荷的溶質(zhì)離子進行可逆交換，依據(jù)這些離子以交換劑具有不同的親和力而將它們分離。以陰離子交換劑為例，其交換過程可表示如下：   x-(溶劑中) (樹脂-r4n cl-)=== (樹脂-r4n x-) cl- (溶劑中)   當交換達平衡時：   kx=[-r4n x-][ cl-]/[-r4n cl-][ x-]   分配系數(shù)為：   dx=[-r4n x-]/[x-]= kx [-r4n cl-]/[cl-]   [討論：dx與保留值的關(guān)系]   凡是在溶劑中能夠電離的物質(zhì)通常都可以用離子交換色譜法來進行分離。離子對色譜法  (ion pair chromatography)   離子對色譜法是將一種 ( 或多種 ) 與溶質(zhì)分子電荷相反的離子 ( 稱為對離子或反離子 ) 加到流動相或固定相中，使其與溶質(zhì)離子結(jié)合形成疏水型離子對化合物，從而控制溶質(zhì)離子的保留行為。其原   離子色譜儀流程示意理可用下式表示：x 水相 y-水相 === x y-有機相   式中：x 水相--流動相中待分離的有機離子（也可是陽離子）；y-水相--流動相中帶相反電荷的離子對（如氫氧化四丁基銨、氫氧化十六烷基三甲銨等）；x y---形成的離子對化合物。   當達平衡時：   kxy = [x y-]有機相/[ x ]水相[y-]水相   根據(jù)定義，分配系數(shù)為：   dx= [x y-]有機相/[ x ]水相= kxy [y-]水相   [討論：dx與保留值的關(guān)系]   離子對色譜法(特別是反相)發(fā)解決了以往難以分離的混合物的分離問題，諸如酸、堿和離子、非離子混合物，特別是一些生化試樣如核酸、核苷、生物堿以及藥物等分離。離子色譜法  (ion chromatography)   用離子交換樹脂為固定相，電解質(zhì)溶液為流動相。以電導檢測器為通用檢測器，為消除流動相中強電解質(zhì)背景離子對電導檢測器的干擾，設置了抑制柱。試樣組分在分離柱和抑制柱上的反應原理與離子交換色譜法相同。   以陰離子交換樹脂（r-oh）作固定相，分離陰離子（如br-）為例。當待測陰離子br-隨流動相（naoh）進入色譜柱時，發(fā)生如下交換反應（洗脫反應為交換反應的逆過程）：   擔體圖示抑制柱上發(fā)生的反應：   r-h na oh- === r-na h2o   r-h na br- === r-na h br-   可見，通過抑制柱將洗脫液轉(zhuǎn)變成了電導值很小的水，消除了本底電導的影響；試樣陰離子br-則被轉(zhuǎn)化成了相應的酸h br-，可用電導法靈敏的檢測。   離子色譜法是溶液中陰離子分析的最佳方法。也可用于陽離子分析。空間排阻色譜法  (steric exclusion chromatography)   空間排阻色譜法以凝膠 (gel) 為固定相。它類似于分子篩的作用，但凝膠的孔徑比分子篩要大得多，一般為數(shù)納米到數(shù)百納米。溶質(zhì)在兩相之間不是靠其相互作用力的不同來進行分離，而是按分子大小進行分離。分離只與凝膠的孔徑分布和溶質(zhì)的流動力學體積或分子大小有關(guān)。試樣進入色譜柱后，隨流動相在凝膠外部間隙以及孔穴旁流過。在試樣中一些太大的分子不能進入膠孔而受到排阻，因此就直接通過柱子，首先在色譜圖上出現(xiàn)，一些很小的分子可以進入所有膠孔并滲透到顆粒中，這些組分在柱上的保留值最大，在色譜圖上最后出現(xiàn)。分析方法：綜述  色譜柱的填料和流動相的組分應按各品種項下的規(guī)定.常用的色譜柱填料有硅膠和化學鍵合硅膠。后者以十八烷基硅烷鍵合硅膠最為常用,辛基鍵合硅膠次之,氰基或氨基鍵合硅膠也有使用；離子交換填料,用于離子交換色譜；凝膠或玻璃微球等，用于分子排阻色譜等。注樣量一般為數(shù)微升。除另有規(guī)定外，柱溫為室溫，檢測器為紫外吸收檢測器。   在用紫外吸收檢測器時,所用流動相應符合紫外分光光度法項下對溶劑的要求。   正文中各品種項下規(guī)定的條件除固定相種類、流動相組分、檢測器類型不得任意改變外，其余如色譜柱內(nèi)徑、長度、固定相牌號、載體粒度、流動相流速、混合流動相各組分的比例、柱溫、進化學鍵合固定相反應樣量、檢測器的靈敏度等，均可適當改變,   以適應具體品種并達到系統(tǒng)適用性試驗的要求。一般色譜圖約于20分鐘內(nèi)記錄完畢。 2.系統(tǒng)適用性試驗   按各品種項下要求對儀器進行適用性試驗，即用規(guī)定的對照品對儀器進行試驗和調(diào)整,應達到規(guī)定的要求；或規(guī)定分析狀態(tài)下色譜柱的最小理論板數(shù)、分離度和拖尾因子.色譜柱的理論板數(shù)  在選定的條件下，注入供試品溶液或各品種項下規(guī)定的內(nèi)標物質(zhì)溶液，記錄色譜圖化學鍵合固定相應用，量出供試品主成分或內(nèi)標物質(zhì)峰的保留時間t(r)和半高峰寬w(h/2)，按n＝5.54[t(r)╱w(h/2)]^2計算色譜柱的理論板數(shù)，如果測得理論板數(shù)低于各品種項下規(guī)定的最小理論板數(shù)，應改變色譜柱的某些條件（如柱長、載體性能、色譜柱充填的優(yōu)劣等），使理論板數(shù)達到要求。分離度  定量分析時，為便于準確測量，要求定量峰與其他峰或內(nèi)標峰之間有較好的分離度。分離度（r）的計算公式為： 2[t(r2)-t(r1)] ，r＝ -w1＋w2 式中 t(r2)為相鄰兩峰中后一峰的保留時間； t(r1)為相鄰兩峰中前一峰的保留時間； w1及w2為此相鄰兩峰的峰寬。 除另外有規(guī)定外，分離度應大于1.5。拖尾因子  為保證測量精度，特別當采用峰高法測量時，應檢查待測峰的拖尾因子(t)是否符合各品種項下的規(guī)定,或不同濃度進樣的校正因子誤差是否符合要求。拖尾因子計算公式為：   w(0.05h) t＝-2d1 式中 w(0.05h)為0.05峰高處的峰寬；   d1為峰極大至峰前沿之間的距離。 除另有規(guī)定外，t應在0.95～1.05間。   也可按各品種校正因子測定項下，配制相當于80％、100％和120％的對照品溶液，加入規(guī)定量的內(nèi)標溶液，配成三種不同濃度的溶液，分別注樣3次,計算平均校正因子，其相對標準偏差應不大于2.0％。





            


            
            
            
            
            
            
            
            
            
            
        

        
        

            

                為您推薦
                
            

            

                
                
            

        

    

    






 






Copyright© 2005-2022   www.www.y6559.cn 版權(quán)所有 【內(nèi)容整理自網(wǎng)絡，若有侵權(quán)，請聯(lián)系刪除】
滇ICP備19000309號-2														

服務熱線：192-7871-9469 (微信同號，注明來源)　網(wǎng)址：www.www.y6559.cn

 




    
    
    




特级西西人体444WWW高清大胆 










国产欧美精品亚洲日本一区|

国产乱女婬AV麻豆国产|

国内精自视频品线一二区|

国产精品永久久久久久久久久|

亚洲AV无码片一区二区三区|

国产免费一区二区三区免费视频|

国产欧美日韩精品一区二区三区|

日日噜噜噜噜人人爽亚洲精品|

日韩精品无码视频免费专区网站|

中文字幕无码免费久久9一区9|